DNA提取原理(過(guò)柱法)
發(fā)表時(shí)間:2023-09-20DNA是生命的基石,它決定了遺傳特征,驅(qū)動(dòng)著進(jìn)化,支持著細(xì)胞功能。它是生物學(xué)、醫(yī)學(xué)和遺傳學(xué)的關(guān)鍵,也是解決疾病、推動(dòng)科學(xué)研究的基礎(chǔ)。DNA的重要性在于它是生命的指南針,啟示了無(wú)限的科學(xué)和醫(yī)學(xué)可能性。此外,DNA還承載了人類歷史的遺傳信息,連接著世代之間的紐帶。它是我們深入探索生命奧秘的關(guān)鍵,也是塑造未來(lái)的不可或缺的一環(huán)。
因此了解如何從紛亂繁雜的生物大分子中提取出DNA也是科研中重要一環(huán)。過(guò)柱法是常用提取DNA的方法,它是通過(guò)DNA與硅膠的親和性,再通過(guò)漂洗-離心、洗滌等步驟將DNA從細(xì)胞中提取的方法?,F(xiàn)在同大家分享下DNA提取原理(過(guò)柱法)。
DNA提取原理(過(guò)柱法),最主要就是利用硅基質(zhì)膜的親和性,以便于將DNA和蛋白質(zhì)、多肽、多糖等其他細(xì)胞成分分離開(kāi)。
一、細(xì)胞破碎
首先,樣本中的細(xì)胞或組織必須被破碎,以釋放DNA。這可以通過(guò)多種方法實(shí)現(xiàn),包括酶解、堿性溶液、熱處理等。破碎過(guò)程會(huì)使細(xì)胞膜和細(xì)胞核膜破裂,并滅活細(xì)胞內(nèi)核酸酶,釋放DNA分子。
二、硅膠吸附
硅基質(zhì)膜是一種多孔性材料,表面附帶有大量硅醇鍵。又因硅基質(zhì)膜表面的大量硅醇基團(tuán)呈弱酸性,在其水化后帶負(fù)電。當(dāng)溶液中存在較高濃度的陽(yáng)離子后(高鹽環(huán)境),其形成陽(yáng)離子橋能夠和DNA、硅醇基團(tuán)表面負(fù)電荷中和,從而使DNA吸附在硅基質(zhì)膜表面,而其他雜質(zhì)將被排除。
三、漂洗離心
再通過(guò)一系列不同試劑進(jìn)行快速漂洗-離心的步驟,通過(guò)抑制物去除劑、漂洗液將代謝廢物、蛋白質(zhì)等雜質(zhì)去除掉,以確保提取的DNA是純凈的。
四、低鹽洗脫
處于低鹽狀態(tài)下時(shí),由于硅基質(zhì)膜的硅醇基團(tuán)與DNA磷酸基團(tuán)之間存在靜電排斥,硅基質(zhì)膜釋放DNA,所以利用低鹽緩沖液將硅基質(zhì)膜中的DNA洗脫。
總的來(lái)說(shuō),DNA提取原理(過(guò)柱法)就是利用硅基質(zhì)膜的親和性,使DNA被其吸附,再通過(guò)漂洗-離心,洗脫等操作得到純凈DNA的操作。
以上便是DNA提取原理(過(guò)柱法)的全部?jī)?nèi)容。北京百奧創(chuàng)新科技有限公司提供Zymo DNA提取(入柱法)試劑盒,歡迎咨詢采購(gòu)!