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DNA提取原理(磁珠法)

發(fā)表時(shí)間:2023-09-19

DNA(脫氧核糖核苷酸)在生物學(xué)和遺傳學(xué)中具有極其重要的地位。DNA是存儲(chǔ)生物體遺傳信息的載體,它決定了生物遺傳特征和功能的遺傳代碼,DNA在醫(yī)學(xué)、生物工程和基因編輯、科學(xué)研究等都有極為重要的作用。總的來說,DNA是生命科學(xué)的核心分子,對(duì)于了解生命的本質(zhì),是不可繞過的重要一節(jié)。它被認(rèn)為是生命的基礎(chǔ),對(duì)人和自然界都有深遠(yuǎn)的影響。因此,DNA提取是生物技術(shù)中的重要一環(huán)。以下便是DNA提取原理(磁珠法)的具體內(nèi)容

DNA提取原理(磁珠法)的最主要因素是磁性珠子(磁珠)上表面的基團(tuán)與DNA磷酸基團(tuán)、鹽溶液中金屬離子所形成的相互作用

磁珠的表面通常被修飾或涂覆上一層特殊的分子,例如硅膠或其他具有親和性的分子或基團(tuán)(DNA/RNA提取多為羧基)。這些分子能夠與DNA相互吸引和結(jié)合,因?yàn)?/span>DNA分子上帶有帶電的磷酸基團(tuán),而修飾的磁珠表面帶有相應(yīng)的親和性分子。

DNA提取(磁珠法)中多用聚乙二醇(PEG)。低濃度的PEG作為聚合劑,還能保持溶液的沾度,使磁珠可以保持懸浮狀態(tài),不易聚沉,也不易造成非特異性吸附。

DNA提取原理(磁珠法)最關(guān)鍵的因素即為PEGNaCl促進(jìn)作用下,因DNA構(gòu)陷變化,從而使得磷酸骨架上的帶負(fù)電的磷酸基團(tuán)與磁珠表面的羧基結(jié)合,磷酸基團(tuán)(負(fù)電荷)借助著鹽溶液中的的Na+離子與磁珠上羧基(負(fù)電荷)所形成的“陰離子-陽離子-陰離子”鹽橋,使DNA被特異性吸附到磁珠表面。

當(dāng)緩沖液被棄除后,加入水性分子,DNA分子會(huì)被快速水化,鹽橋中三者間的離子相互作用被解除,使得被吸附到磁珠上的DNA分子被純化出來。

應(yīng)用外部磁場(chǎng)可以方便地控制磁珠的位置。通過將樣本混合磁珠后,應(yīng)用磁場(chǎng)使磁珠集中在一個(gè)區(qū)域,而未結(jié)合的雜質(zhì)則可以輕松去除,從而實(shí)現(xiàn)DNA的分離和洗脫

總之,DNA提取原理(磁珠法)就是利用磁性珠子表面的特殊化學(xué)性質(zhì),與DNA之間的親和性相互作用,以及外部磁場(chǎng)的幫助,能夠高效地提取和分離DNA,使得DNA提取(磁珠法)成為一種廣泛應(yīng)用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)和臨床診斷的有效技術(shù)。

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