產(chǎn)品介紹

Polyplus DNA轉(zhuǎn)染試劑jetPEI® (101000053)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介：

jetPEI®轉(zhuǎn)染試劑是一種線性聚乙烯亞胺衍生物，不含動(dòng)物來(lái)源的成分，可向粘附細(xì)胞和懸浮細(xì)胞提供高效且可重復(fù)的基因遞送。因此，jetPEI®轉(zhuǎn)染試劑特別適合自動(dòng)化或手動(dòng)HTS（高通量篩選），有三種方案可供選擇：反向、分批和正向。

一、3種方案可供選擇

在正向方案中，細(xì)胞在轉(zhuǎn)染前一天分裂，并將jetPEI®/DNA復(fù)合物添加到粘附細(xì)胞或懸浮細(xì)胞中。

當(dāng)轉(zhuǎn)染基因庫(kù)（如DNA文庫(kù)）時(shí)，反向方案是 的（圖1）。在該方案中，在加入細(xì)胞之前，將jetPEI®/DNA復(fù)合物制備或沉積在孔中。配合物可穩(wěn)定長(zhǎng)達(dá)4小時(shí)（圖2）。

已經(jīng)開(kāi)發(fā)了分批處理方案來(lái)制備轉(zhuǎn)染細(xì)胞的均勻池。為此，細(xì)胞在胰蛋白酶消化后立即轉(zhuǎn)染，同時(shí)仍處于懸浮狀態(tài)。該方案優(yōu)選用于藥物篩選應(yīng)用，并允許快速處理，比正向方案快一天。

圖1:jetPEI®HTS應(yīng)用的反向轉(zhuǎn)染方案

二、強(qiáng)大的轉(zhuǎn)染復(fù)合物

與基于脂質(zhì)的試劑和磷酸鈣相比，水溶性聚合物jetPEI®和DNA形成的復(fù)合物可以有效轉(zhuǎn)染長(zhǎng)達(dá)4小時(shí)。因此，它們?cè)试S有足夠的時(shí)間將復(fù)合物分配到板中（圖2）。

圖2：復(fù)合物形成孵育時(shí)間對(duì)jetPEI®轉(zhuǎn)染效率的影響。按照反向轉(zhuǎn)染方案，用pCMVLuc和jetPEI®在96孔板中轉(zhuǎn)染HEK-293細(xì)胞。24小時(shí)后測(cè)定螢光素酶活性。

三、批間再現(xiàn)性

使用jetPEI®的HTS DNA轉(zhuǎn)染從一批到另一批具有高度一致的轉(zhuǎn)染效率（圖3）。

圖3：使用jetPEI®的批次間再現(xiàn)性。對(duì)于每批，使用24孔板的標(biāo)準(zhǔn)方案，在血清存在下一式三份轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞。

四、適用于多種細(xì)胞類型

jetPEI®成功地將基因遞送到各種粘附和非粘附細(xì)胞系以及原代細(xì)胞（表1）。Polyplus轉(zhuǎn)染試劑jetPEI®在550多種出版物中出現(xiàn)。此外，Polyplus的在線數(shù)據(jù)庫(kù)為400多個(gè)細(xì)胞系和原代細(xì)胞提供了特定的轉(zhuǎn)染條件。

表1：使用jetPEI®成功轉(zhuǎn)染的一些常見(jiàn)細(xì)胞系和原代細(xì)胞。

五、優(yōu)異的轉(zhuǎn)染結(jié)果

將jetPEI®與其他幾種流行的轉(zhuǎn)染試劑進(jìn)行比較（圖4）。jetPEI®被發(fā)現(xiàn)提供了 性能：高效率和低可變性（小標(biāo)準(zhǔn)偏差）。

圖4：一系列商業(yè)試劑的轉(zhuǎn)染效率。根據(jù)制造商的方案，在10%血清存在的情況下，使用1μg pCMV螢光素酶在24孔板中轉(zhuǎn)染HeLa細(xì)胞。轉(zhuǎn)染后24小時(shí)測(cè)量螢光素酶的表達(dá)。

產(chǎn)品屬性：

產(chǎn)品名稱	jetPEI®
遞送分子	DNA
應(yīng)用	質(zhì)粒轉(zhuǎn)染、高通量篩選（HTS）
細(xì)胞類型	粘附細(xì)胞和懸浮細(xì)胞
轉(zhuǎn)染次數(shù)	在96孔板中，1mL jetPEI®可轉(zhuǎn)染2000次
儲(chǔ)存	在5°C±3°C的溫度下儲(chǔ)存jetPEI®

產(chǎn)品應(yīng)用：Polyplus的jetPEI®試劑非常適合質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染，尤其是高槽點(diǎn)篩選（HTS）應(yīng)用。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

 ★  非常適合貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞

    ★   HTS細(xì)胞轉(zhuǎn)染的快速有效方法

 ★  與血清和抗生素兼容

 ★   異?？芍貜?fù)的結(jié)果

 ★   提供反向、批處理和正向方案

產(chǎn)品訂購(gòu)：

貨號(hào)	產(chǎn)品名稱	NaCl量
101000053	jetPEI® 1 mL	50 ml
101000020	jetPEI® 4 x 1 mL	4 x 50 ml