產(chǎn)品詳請(qǐng)
產(chǎn)地 | |
品牌 | Serochem |
貨號(hào) | |
用途 | 細(xì)胞轉(zhuǎn)染 |
包裝規(guī)格 | |
CAS編號(hào) | |
純度 | % |
是否進(jìn)口 | 是 |
PEI Prime™? Powder, Transfection Grade Linear Polyethylenimine
產(chǎn)品明細(xì):
產(chǎn)品名稱:PEI Prime™ Powder 轉(zhuǎn)染試劑
品牌名稱:Serochem
產(chǎn)品編號(hào):Primer-P100-1G/100mG
產(chǎn)品規(guī)格:1g和100mg
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
PEI Prime™是以一種陽(yáng)離子高分子聚合物-聚乙烯亞胺(polyethylenimine,PEI)為載體的基因轉(zhuǎn)染試劑。PEI是在pH中性溶液中具有極高正電荷密度的合成聚合物。帶正電的PEI與帶負(fù)電的DNA牢固結(jié)合,并賦予凈陽(yáng)離子電荷,使DNA進(jìn)入細(xì)胞。PEI Prime™是一種高性能轉(zhuǎn)染試劑,利用PEI的特性旨在實(shí)現(xiàn)高產(chǎn)量,可重復(fù)性和可擴(kuò)展的瞬時(shí)基因表達(dá)。
應(yīng)用范圍
它能夠高效率轉(zhuǎn)染多種細(xì)胞系,包括貼壁細(xì)胞和懸浮細(xì)胞。此外,PEI是最普遍的用于HEK293和CHO懸浮細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑。PEI Prime™是生產(chǎn)任何具有成本效益的生物制劑的jue佳選擇,包括重組蛋白,抗體和病毒。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì):
1低毒,高效2 操作簡(jiǎn)單,高性價(jià)比
3 可提供 、具有可重復(fù)性的轉(zhuǎn)染結(jié)果
4 適用于快速、高通量轉(zhuǎn)染流程
轉(zhuǎn)染步驟:
以HEK293貼壁細(xì)胞為例,步驟如下:1 細(xì)胞接種:細(xì)胞密度2-6 x106 cells/mL.
2 質(zhì)粒的準(zhǔn)備:在5%最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,每10 6個(gè)細(xì)胞稀釋1.0 ug pDNA。
3 PEI的準(zhǔn)備:在5%最終培養(yǎng)體積的DMEM或培養(yǎng)基中,每10 6個(gè)細(xì)胞稀釋3.0 ug PEI Prime,混勻
4 通過快速,短暫渦旋或顛倒數(shù)次試管,將pDNA和PEI Prime™溶液混合在一起。
5 使pDNA和PEI的混合物在室溫下靜置10分鐘。
6 一邊旋轉(zhuǎn)板,一邊將pDNA和PEI混合物逐漸滴加到細(xì)胞中。
7 于37℃ CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
轉(zhuǎn)染的優(yōu)化:
為達(dá)到高轉(zhuǎn)染效率和低細(xì)胞毒性的 結(jié)果,可以進(jìn)行如下優(yōu)化:參數(shù) | 范圍 |
PEI濃度 | 3.50-6.50mg/(L final culture) |
DNA濃度 | 0.75-1.5mg/(L final culture) |
PEI/DNA混勻時(shí)間 | 5.0-15.0minutes |
使用PEI Prime™(PEI:DNA濃度比3:1)或某 PEI,用CMV-SEAP質(zhì)粒轉(zhuǎn)染20ml 含HEK293懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)物。 轉(zhuǎn)染后5天,使用磷酸酶報(bào)告染料和UV / Vis檢測(cè)SEAP表達(dá)水平。數(shù)據(jù)表示占某 PEI的SEAP表達(dá)水平的百分比。結(jié)果顯示我們的產(chǎn)品PEI Prime 的轉(zhuǎn)染效率比 好的同類廠家高出40%。
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