1.簡(jiǎn)介

CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus是一組弱陽(yáng)離子交換層析填料。結(jié)合容量和結(jié)合動(dòng)力學(xué)高于IEX  SepFast  HighRes。由于CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus具有高分辨率和高載量，特別適用于需要以高通量和高成本效益的方式純化困難分子的過(guò)程。

CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus采用平衡設(shè)計(jì)，可提供高分辨率和高載量，以分離生物工藝應(yīng)用中的類似成分。核心優(yōu)勢(shì)是：

·高流速下的高樣品載量

·高載量下的高分辨率

基礎(chǔ)基質(zhì)基質(zhì)由高度交聯(lián)的瓊脂糖和葡聚糖制成，具有優(yōu)異的流動(dòng)性。它對(duì)生物加工行業(yè)中遇到的大多數(shù)化學(xué)條件都非常穩(wěn)定。

2. 產(chǎn)品特性

表1  CM SepFast HighRes Plus的特性

	CM SepFast HighRes Plus
基質(zhì)	葡聚糖接枝高度交聯(lián)瓊脂糖
功能配體	羧甲基弱陽(yáng)離子
總離子容量	0.08-0.13 mmol/ml
動(dòng)態(tài)結(jié)合容量*	>130 mg lysozyme/ml
粒徑	20 - 50 μm
壓力-流速特性**	推薦30-150 cm/hr
操作壓力	Up to 3 bar
pH穩(wěn)定性	2-14 (短期)，4-12 (長(zhǎng)期)
工作溫度	4℃-30℃
化學(xué)穩(wěn)定性	所有常用的緩沖液；1 M乙酸、1 M NaOH、6 M鹽酸胍、8 M 尿素、30% 異丙醇、70% 乙醇
注意事項(xiàng)	避免氧化劑和陽(yáng)離子洗滌劑
保存	20% 乙醇

*測(cè)試條件：10  mM緩沖液 pH  7.5，上樣5 mg/ml 蛋白質(zhì)，停留時(shí)間5分鐘，50%穿透。

3.方法優(yōu)化

建議在載量、流速、結(jié)合pH值、結(jié)合離子強(qiáng)度、洗脫速度和梯度等參數(shù)之間進(jìn)行篩選。由于CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus的快速孔隙可及性，結(jié)合步驟可以在比洗脫步驟更快的流速下完成。建議特別注意優(yōu)化洗脫條件以獲得最佳分離能力。

強(qiáng)離子交換層析填料可以在較寬的pH范圍內(nèi)保持其電荷（并因此保持其功能），而弱離子交換層析填料的離解程度和離子交換容量隨pH值而變化。因此，如果使用弱離子交換層析填料，優(yōu)化pH值更為關(guān)鍵。

通常在優(yōu)化方法時(shí)，平衡組分分離度與工藝產(chǎn)量是主要考慮因素。此外，對(duì)于不穩(wěn)定或對(duì)剪切力敏感分子的純化，需要優(yōu)化操作條件以平衡產(chǎn)量和對(duì)目標(biāo)分子可能造成的損害。

4.裝柱

CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus由高度交聯(lián)的珠狀瓊脂糖制成，具有出色的機(jī)械強(qiáng)度。CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus可以很容易地以任何可能的填充方式填充到任何類型的色譜柱中。典型的包裝壓力高達(dá)3 bar。

5.保養(yǎng)

根據(jù)不同的應(yīng)用，層析填料可能會(huì)被多次使用。如需重復(fù)使用，請(qǐng)參閱以下說(shuō)明。

（1）再生

每次運(yùn)行后，用高離子強(qiáng)度溶液（例如1M NaCl緩沖液）或增加pH 值。

（2）就地清洗  (CIP)

CIP是一種去除強(qiáng)結(jié)合物質(zhì)的程序，例如再生后殘留在吸附劑表面的脂質(zhì)、內(nèi)毒素和變性蛋白質(zhì)。定期 CIP 可防止污染物在填充床中積聚，并有助于保持色譜柱性能。

應(yīng)根據(jù)存在的污染物類型為每個(gè)過(guò)程制定具體的 CIP程序。CIP 的頻率取決于各個(gè)應(yīng)用的性質(zhì)。

以下信息可作為一般指導(dǎo)：濃度高達(dá)2 M的鹽可用于清除因離子相互作用而結(jié)合的雜質(zhì)。疏水性結(jié)合的污染物可以通過(guò)以下試劑去除：1 M NaOH、低比例的非離子洗滌劑（例如0.1-2%）、堿性或酸性條件下的30%  異丙醇（例如在乙酸或磷酸存在下）。也可以探索上述試劑的組合。一般來(lái)說(shuō)，孵育時(shí)間應(yīng)該更長(zhǎng)（例如從 30 min到2 h），以確保污染物完全解離。

（3）消毒

建議使用0.5?1.0 M NaOH接觸1 h進(jìn)行消毒。

6.儲(chǔ)存

CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus應(yīng)儲(chǔ)存在20%乙醇中（強(qiáng)陽(yáng)離子交換層析填料含有0.2 M NaAC）以防止微生物生長(zhǎng)。CM離子交換層析填料SepFast HighRes Plus存儲(chǔ)在4℃到30℃的溫度下。使用前，用至少5倍體積的運(yùn)行緩沖液來(lái)平衡層析填料。

7.更多信息

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8.訂購(gòu)信息